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第一篇 医学免疫学实验1

绪论1

一、医学免疫学与病原生物学实验目的与要求1

二、医学免疫学与病原生物学实验室规则1

三、普通光学显微镜的使用与保护2

第一章 体液免疫相关的基本实验9

第一节 抗原抗体反应的基本原理9

一、抗原抗体反应的基本原理9

二、抗原抗体反应的特点9

三、抗原抗体反应的影响因素10

四、抗原抗体反应的类型10

第二节 凝集反应10

一、直接凝集反应11

二、间接凝集反应13

第三节 沉淀反应15

一、环状沉淀试验16

二、单向琼脂扩散试验16

三、双向琼脂扩散试验18

四、火箭电泳19

五、对流免疫电泳21

六、免疫电泳21

第四节 补体参与的反应23

一、溶血试验23

二、补体结合试验24

三、CH50法测定血清总补体活性25

第二章 免疫细胞功能测定27

第一节 固有免疫细胞功能的检测27

一、中性粒细胞吞噬功能测定27

二、中性粒细胞硝基四氮唑蓝还原能力的测定28

三、巨噬细胞吞噬功能的测定29

附：小鼠腹腔注射法30

第二节 获得性免疫细胞功能的检测31

一、淋巴细胞转化试验31

二、E花环试验33

第三章 免疫标记技术35

第一节 免疫荧光技术35

一、直接免疫荧光法测抗原36

二、间接免疫荧光法测抗原37

第二节 免疫酶技术39

甲胎蛋白检测（ELISA双抗体夹心法）40

第三节 放射免疫技术43

放射免疫法测定43

第四章 淋巴细胞的分离46

第一节 人外周血单个核细胞的分离46

第二节 T淋巴细胞、B淋巴细胞的分离纯化48

一、免疫磁珠法分离淋巴细胞48

二、花环沉降法分离T淋巴细胞和B淋巴细胞49

三、尼龙棉柱法分离T淋巴细胞和B淋巴细胞50

第三节 淋巴细胞片的制备52

附一：细胞计数方法52

附二：细胞活性检测54

附三：细胞冻存54

第五章 细胞免疫功能检测57

第一节 细胞毒性T细胞杀伤功能测定57

第二节 细胞因子检测技术58

第六章 超敏反应检测61

第一节 动物过敏反应试验61

第二节Ⅰ型超敏反应检测63

一、Ⅰ型超敏反应皮肤试验63

二、血清总IgE检测64

三、血清特异性IgE检测65

第三节 迟发型超敏反应皮肤试验66

第二篇 医学微生物学实验71

第七章 病原生物学实验室常用仪器和设备71

一、高压蒸汽灭菌器71

二、恒温培养箱72

三、超净工作台73

四、生物安全柜74

五、超低温冰箱75

六、无菌室76

七、接种环和接种针77

第八章 细菌学基本实验方法与技能78

第一节 细菌的基本形态和特殊结构的观察78

第二节 细菌动力的观察80

一、悬滴检查法80

二、压滴检查法81

三、暗视野显微镜检查法（示教）82

四、半固体琼脂检查法83

第三节 细菌的染色法83

一、单染色法84

二、革兰氏染色法85

三、特殊染色法86

四、荧光染色法89

附录：染色液的配制89

第四节 常用培养基的制备与细菌的人工培养92

一、细菌常用培养基的配制92

二、细菌培养方法95

第五节 细菌生化鉴定法98

一、单糖发酵试验99

二、硫化氢试验100

三、尿素分解试验100

四、触酶试验101

五、氧化酶试验101

六、IMViC试验102

附录104

第六节 正常人体和环境中细菌的检查106

一、皮肤细菌的检查106

二、咽喉部细菌的检查107

三、水中细菌的检查107

四、空气中细菌的检查108

第七节 外界因素对细菌的影响109

一、高压蒸气灭菌法109

二、干烤箱110

三、间歇灭菌111

四、煮沸消毒法111

五、紫外线杀菌112

六、滤过除菌112

七、常用消毒剂的抑菌作用113

八、手指消毒前后的细菌学检查113

九、细菌对抗生素的敏感性试验（纸片琼脂扩散法）114

十、细菌对中草药敏感试验115

附录116

第八节 细菌的遗传与变异117

一、细菌的变异现象观察117

二、接合传递试验119

三、转化试验120

四、细菌质粒DNA的提取122

五、琼脂糖凝胶电泳123

第九节 细菌的血清学诊断124

第十节 临床标本的采集与处理方法125

一、标本的采集和处理原则126

二、常见待检标本的采集方法126

第九章 几种细菌性疾病的实验室诊断129

第一节 化脓性球菌的分离鉴定129

一、形态、染色性及培养特性观察129

二、葡萄球菌血浆凝固酶试验130

三、肺炎链球菌乙基氢化羟基奎宁（optochin）敏感试验131

四、肺炎链球菌胆汁溶菌试验132

五、脓汁标本中病原菌（葡萄球菌）的分离鉴定133

六、咽拭子、血液标本中病原菌（乙型溶血性链球菌）的分离鉴定134

七、脑脊液标本中病原菌（脑膜炎奈瑟菌）的分离鉴定136

八、泌尿生殖道脓性分泌物中淋病奈瑟菌的检查137

附录138

第二节 致病性肠道杆菌的实验室诊断139

一、主要肠道杆菌形态及染色性观察139

二、主要肠道杆菌的培养特性观察140

三、粪便标本中肠道病原菌的分离鉴定140

四、肥达反应144

附录145

第三节 分枝杆菌的检测146

一、结核分枝杆菌的检测147

二、麻风分枝杆菌的检测151

附录152

第四节 厌氧菌的检测153

一、厌氧芽胞梭菌153

二、无芽胞厌氧菌155

附录155

第五节 动物源性细菌的检测156

一、布鲁菌属157

二、鼠疫耶尔森菌157

三、炭疽芽胞杆菌158

附录159

第六节 白喉棒状杆菌的检测159

一、白喉棒状杆菌的染色160

二、白喉棒状杆菌的分离培养160

附录：染色液的配制161

第七节 弧菌和螺杆菌的检测161

一、霍乱弧菌和副溶血性弧菌的形态观察162

二、霍乱弧菌和副溶血性弧菌的培养现象观察162

三、霍乱弧菌和副溶血性弧菌的生化反应鉴定163

四、霍乱弧菌感染的快速诊断164

五、幽门螺杆菌的分离鉴定165

附录167

第八节 其他微生物感染的检测168

一、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体的检测169

二、放线菌的检测173

三、真菌的检测173

附录176

第十章 病毒学实验177

第一节 病毒的培养法177

一、动物接种法177

二、鸡胚接种法178

三、组织培养法181

附录182

第二节 病毒的定量法183

一、50％组织细胞感染量183

二、空斑形成试验184

第三节 病毒性感染的快速诊断185

一、显微镜检测病毒颗粒185

二、检测病毒抗原186

三、检测病毒核酸187

四、检测病毒特异IgM抗体190

第四节 流感病毒的血凝与血凝抑制试验190

一、血凝试验190

二、血凝抑制试验192

附录193

第五节 乙型肝炎病毒抗原抗体的检测（ELISA）193

一、ELISA双抗体夹心法检测HBsAg（一步法）194

二、ELISA双抗原夹心法检测抗-HBs195

三、ELISA竞争法检测抗-HBe196

四、ELISA捕获法检测抗-HBc IgM197

第六节 人类免疫缺陷病毒感染的实验室诊断198

一、初筛试验-酶联免疫法（ELISA）检测HIV特异抗体199

二、确证试验-免疫印迹法检测HIV特异性抗体200

第三篇 医学寄生虫学205

第十一章 医学蠕虫205

第一节 似蚓蛔线虫（蛔虫）205

第二节 蠕形住肠线虫（蛲虫）、美洲板口线虫及十二指肠钩口线虫208

第三节 旋毛形线虫、班氏丝虫与马来丝虫210

第四节 卫氏并殖吸虫（肺吸虫）和日本裂体吸虫（日本血吸虫）212

第五节 链状带绦虫（猪带绦虫）和肥胖带绦虫（牛带绦虫）217

第六节 细粒棘球绦虫（包生绦虫）和微小膜壳绦虫（短膜壳绦虫）220

第十二章 医学原虫224

第一节 蓝氏贾第鞭毛虫和阴道毛滴虫224

第二节 疟原虫、溶组织内阿米巴225

第十三章 医学节肢动物231

第一节 蜱、蚊、蝇、蚤231

第二节 蠕形螨自检233

参考文献234

彩图235